訓練自己用眼睛測量OD600:一種改進的方法

回到八月，我分享了我猜測OD的訓練方案₆₀₀微生物培養的讀數具有超人的準確性．雖然我的方法是有效的，但我承認它有兩個缺點:你需要為每種容器類型製定單獨的標準曲線，猜測不是官方認可的科學方法。但是現在，感謝一位有幫助的讀者的評論，我可以提出一種替代方案，它克服了這些缺點，並且仍然繞過了對規範的需要。

該方法采用麥克法蘭濁度標準。這些是已知濁度的溶液，用於臨床抗生素敏感性試驗中標準化培養密度。測試者將細菌培養物與麥克法蘭標準進行比較，方法是將細菌培養物並排放在“維克漢姆卡”(Wickerham card，即印有黑色條紋的白色卡)麵前。濁度與標準相似的培養物將使黑線模糊到大約相同的程度。

這些標準可以很容易地用於估計OD值₆₀₀．簡單地保留一些麥克法蘭標準，這些標準對應於對您最有用的消耗過量的範圍。按照我原來的方法，為了準確的比較，培養物和標準品應該在同一類型的容器中，但是你可以根據需要製作一大批標準品倒入不同的容器中。

如何製定麥克法蘭標準

麥克法蘭標準是硫酸鋇沉澱物的懸浮液，它是由不同數量的氯化鋇與硫酸混合而成。

如果容器被密封以防止蒸發，它們可以使用大約六個月。你也可以買現成的麥克法蘭標準，由乳膠珠製成，可以無限期保存。

使用麥克法蘭標準的技巧

• 你可以用任何你喜歡的方式製作“Wickerham卡片”——例如，用圖案或文字。我發現我可以通過把樣品和標準品對著光來進行最敏感的區分。

• 請記住，麥克法蘭標準單位的編號與外徑並不對應₆₀₀價值。麥克法蘭標準0.5應該有外徑₆₀₀在0.08到0.1之間但是你必須確定這個關係用你的分光光度計。

• 你需要用分光光度計做一些測試，以便習慣於將標準培養基與真實培養基進行比較。例如，市麵上可以買到的乳膠珠子會給溶液帶來輕微的藍色，這可能會分散注意力。我還發現，在相同的濁度下，酵母培養物與珠子的外觀略有不同，可能是因為它們的顆粒大小不同。

這一切的美妙之處在於，用這種方式監測細胞密度根本不需要時間，而且該過程可以在任何實驗室中準確描述和複製。