如何轉換你的圖像從平庸到出版質量Köhler照明

你花了幾天，也許是幾周或幾個月的時間，把保存好的組織管藏在實驗室長凳下的黑暗抽屜裏，就像一個瘋狂的連環殺手的戰利品一樣。

在切片的處理、嵌入和切片上，組織學方麵已經花費了數小時。

最後，就像在戰鬥中獲勝的戰士一樣，你高舉著薄薄的玻璃獎杯，在實驗室的熒光燈下閃閃發光，你站在那裏，穿著沾有蘇木精的實驗室大褂，在向下流動的長凳和通風櫃的轟鳴聲中狂笑。

現在你有了彩色的小肉塊，你需要拍一些照片。如果你隻需要你的實驗書的圖片，那麼你隻需要把幻燈片放在舞台上，打開相機和電腦，然後就可以走了。

但如果你需要讓人印象深刻的圖片——海報演示、ppt幻燈片、期刊文章，或者隻是為了給你的同行留下深刻印象，那麼在每張圖片上花點時間就能把平庸的圖片(這可能需要你的觀眾發揮一點想象力!)變成明亮均勻、對比鮮明的圖片，應該能從觀眾那裏獲得敬畏和欣賞的快樂聲音。隻要你學會了這個技巧，在你按下快門或點擊“捕捉”之前，它就應該成為你的第二天性。

科勒照明

Köhler照明以它的發明者- August Köhler的名字命名，他在1893年發表了他的技術。憑借出色的工作表現，他被邀請加入卡爾蔡司公司，並在那裏工作了45年。Köhler照明優化顯微鏡的分辨率。

這是一種確保來自顯微鏡內光源的光均勻地照亮載玻片上的標本的方法，產生更清晰的圖像，反過來，增加染色區域和非染色區域之間或組織區域之間的對比度。

毫無疑問，你會看到光在到達舞台之前穿過顯微鏡的各個透鏡和部分的圖。想象一下，小金字塔般的光在它最後的旅程中從次級聚光鏡的透鏡照亮了夾在舞台上的載玻片。這個金字塔的頂端應該在你的部分下盡可能地鋒利，也應該盡可能地靠近視野的中心。

調節這兩個參數的方法是通過將場膜片與次級冷凝器和兩個定心螺釘結合使用。隻有五個步驟Köhler照明。

唯一的麻煩是，由於每個物鏡的數值孔徑和焦距等因素，顯微鏡上每個物鏡的設置都會發生變化。

讓我們來看看這五個簡單的步驟:

(1)如果鏡頭、目鏡、物鏡看起來很髒/有灰塵，我總是建議清洗它們。清洗鏡片本身是另一回事，但一定要使用鏡片清潔紙巾，並使用推薦用於光學鏡片的溶劑。將幻燈片放在舞台上，確保燈光控製在最低設置(如果是單獨的刻度盤)，然後打開燈。

(2)取決於誰最後一次使用/濫用顯微鏡(最近附近有教授嗎?!)將取決於你從目鏡下看時看到的東西。關閉光場膜片——這將是在顯微鏡的底座上，位於光源的上方。當你向下看目鏡時，你現在隻會看到幻燈片的一個小圓圈。

(3)現在聚焦冷凝器。當你坐在顯微鏡前時，調節輪就在對焦盤的前麵。緩慢地上下移動聚光鏡，同時觀察目鏡中的小圈光。你會看到光圈的邊緣會進入和失去焦點(從紅色邊緣變成藍色邊緣)。盡量把刀刃削尖。

(4)一旦你有了尖銳的光圈，看看顯微鏡的整個聚光鏡部分。你會看到兩個定心螺絲。你可以在電場膜片關閉或幾乎完全打開的情況下完成這一階段。我傾向於用我在上麵步驟2中留下的場膜片來做。抓住每一個螺絲，再向下看目鏡。當你轉動螺絲時，你會看到光的圓圈在移動——你的目標是讓這個圓圈在你視野的中間。一旦居中，打開場隔膜，直到黑圈的邊緣剛剛從視野中消失。完成此步驟的另一種方法是再次打開場膜片，但不是全部打開—剛好在邊緣從視野中消失之前打開。然後進行定心操作。完全由你決定!

(5)最後調整到虹膜(或冷凝器光圈)膜片。就在定心螺絲的下方，你會發現另一個與主場膜片相似(但更小)的膜片。在看幻燈片的同時，完全打開它，然後開始關閉它，直到圖像“耀斑”消失。

在那裏。就是這樣。完成了!

記住-關閉光線，聚焦邊緣，中心點，打開光線，減少耀斑。

一旦你們都在自己的顯微鏡上嚐試一下，我很想知道有多少是正確的設置!