細胞培養在預算:簡單的自製修複

哺乳動物細胞培養很容易耗盡資助資金，許多公司都渴望幫助你在預算內進行細胞培養!但你並不總是需要購買昂貴的設備或熱的新試劑來完成這項工作。有時你可以改變協議，節省使用昂貴的試劑。以下是我學到的一些幫助你省錢的技巧，為那些“創造職業生涯”的實驗保留下來。

細胞冷凍室

冷凍細胞對你的研究至關重要，但這些冷凍室可能相當昂貴。或者有時你的實驗室夥伴已經把它們都裝滿並堆在冰箱裏了。一個簡單的解決方案是泡沫聚苯乙烯™機架，配有15mL錐形管。將冷凍瓶放入一個架子上的管子槽中，在上麵放第二個架子，把架子粘在一起，放在-80°C的環境中。泡沫聚苯乙烯™確保樣品的緩慢冷卻。在細胞在-80°C下放置約12小時後，將冷凍瓶轉移到液氮中。

細胞冷凍培養基

標準細胞冷凍培養基為90%胎牛血清(FBS)和10%二甲亞碸(DMSO)。FBS是一種昂貴的試劑。我發現我的大部分細胞在含有10% FBS和10% DMSO的細胞生長培養基中冷凍後恢複得很好。但是，我建議在完全轉換之前先測試一下你的細胞係。

轉染試劑

市麵上有大量的轉染試劑。其中許多允許研究人員可靠地將外源核酸引入難以轉染的細胞。然而，它們可能相當昂貴!如果你不需要轉染培養皿中的每一個細胞(例如，通過抗生素選擇或產生重組病毒來製造穩定的細胞係)，那麼一些老式的方法可能會為你節省一些錢。磷酸鈣轉染它最早是在20世紀60年代發明的，非常便宜，而且操作簡單。類似地，聚乙烯亞胺是一種較便宜的替代品，可用於將DNA引入細胞。

培養細胞免疫熒光(IF)

用於在細胞上執行IF的室載玻片看起來很花哨，可以讓你輕鬆地嚐試多種條件。實際上，我發現它們很難工作-我很難讓細胞均勻地分布在井中。如果你做了大量的if，成本也會增加。組織培養塑料製品也具有固有的自發熒光水平。在做IF時，我仍然使用我在研究生院學到的同樣(更便宜)的方法。我購買小的圓形玻璃罩，在高壓滅菌器中消毒，然後將它們放入6孔盤的孔中，然後在孔中播種細胞。大多數類型的細胞都很容易粘附在玻片上，每種玻片都可以用於不同的實驗條件。我通過去除卡瓦，將它們放在培養皿中的濕紙巾上(細胞麵朝上!)，並在卡瓦上放置足夠稀釋的抗體，以覆蓋卡瓦，但仍允許表麵張力將液體固定在適當的位置。這也節省了使用的抗體的數量。

這些是我在做細胞培養時省錢的一些技巧。你的是什麼?

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