模糊問題:實現和維護一個無汙染的培養箱

當你和很多人共用一個保溫箱時，保持一個幹淨的車間是非常困難的，幾個月或更多的工作可能會因為汙染而損失。

培養箱中最大的兩個漏洞來源是:

1. 水盤
2. 進出的集裝箱。

使用我們現在要告訴你的一些技巧，這兩種細菌都可以保持無菌，所以和討厭的細菌說再見吧!你的孵化器不再有入侵者!

保持孵化器清潔的最佳方法

最適合你的方式在很大程度上取決於你的個人喜好。我們將看看一些可供你選擇的方法，但首先，這是兩個強製性的步驟，可以完成保持孵化器清潔95%的工作。

必填項步驟1

所有步驟中最簡單的一步，這一步是強製性的:培養箱中水盤中的水必須每周更換一次。沒有回旋的餘地!應該使用純淨水。這意味著紫外線消毒和0.22uM過濾或等效。如果你沒有這樣的水，至少用高壓滅菌器消毒。每次打開保溫箱時都要檢查水盤，不要讓水盤變幹，但也要注意不要把水盤填滿。

必填項步驟2

第二步:進入培養箱的任何東西都必須使用70%的IMS(工業甲基化烈酒)或virkon。請注意:乙醇殺死細菌，但不是真菌，所以它不會切斷它!

好了，現在我們已經解決了這些問題，可以隨意選擇下麵的任何一個選項，以盡可能地消除其餘的感染風險。請注意，某些選擇更適合某些類型的孵化器。

保持培養箱清潔的方法

選擇1:硫酸銅

在10l純水中加入10g硫酸銅和0.2 g EDTA。將你的水盤填滿。一旦你看到托盤裏有藍色的沉澱物，就該換溶液了，但最好每周換一次。如果你沒有銅襯裏的CO₂培養箱，硫酸銅可能會腐蝕你的不鏽鋼內部，所以在嚐試這個之前仔細檢查你有什麼!如果你決定你可以使用這個選項，一些東西仍然生長，你可能需要添加更多的硫酸銅。

選擇2:商用抗菌產品

- - - - - -Roccal-D(輝瑞的產品，隻對細菌和病毒有好處，對環境沒有好處!)

- - - - - -明確浴®*(頻譜),Aquaguard-1* (Promokine，適用於不鏽鋼和塑料)，

- - - - - -Aqua EZ清潔(T-Pro生物科技，防止細菌滋生，需要更換時有方便的變色係統)

- - - - - -SigmaClean®*(西格瑪奧德裏奇)

-銀離子棒。這些可能會很貴，如果每個人都照顧好它們，並注意無菌技術，現代孵化器就不需要它們了。如果你決定買的話，還是貨比三家吧，因為有些可以在亞馬遜和eBay等第三方網站上買到，而且便宜得多!

*製造商的網站沒有說明它具體殺死了什麼。

選擇3:疊氮化鈉

我不推薦這個，因為它對環境有害(而且有毒)，但為了完整起見，我把它包括在內。每1L純淨水0.2克疊氮化鈉就足夠了。

處理已經被汙染的孵化器

如果你已經在培養箱裏遇到了一隻不受歡迎的毛茸茸的軟綿綿的，請遵循以下步驟:

1. 取出水盤和水架，用70% IMS消毒後再進行高壓滅菌。用70% IMS擦拭培養箱內外。作為IMS的替代品，您可以使用Spor-Klenz，Mycoplasma-ExS，PromoCidal而且Spore-EX消毒噴霧劑或消毒濕巾。如果你有一個自動清潔的培養箱，至少要進行一個高強度的清潔周期，比如紫外線清潔。
2. 檢查培養箱中的每個燒瓶和其他容器是否有汙染，並在將其放入培養箱之前擦拭幹淨。
3. 向水盤中加入無菌水(如果有的話)以及殺菌劑。
4. 試著找出汙染是從哪裏來的。如果所有的燒瓶都沒有被汙染，那麼很可能是鍋裏的水。或者，如果你有一個自清潔的培養箱，可能是連接到培養箱的水源有問題。看看附近有沒有其他實驗室也有同樣的問題。
5. 一旦一切看起來都幹淨了，你可以把一瓶幹淨的培養基或一個打開的瓊脂板放在那裏幾天，看看是否有東西生長。請注意，培養箱在這段時間內不應該被打擾，以防止蟲子飄進來，給你假陽性。
6. 如果汙染再次出現，和你的實驗室小組談談如何在未來避免汙染(改進無菌技術等)。可能是有人把水盤填得太滿了，或者是其他容易解決的問題，但最壞的情況是買一個新的水盤。

有關更完整的指南，請參見這BitesizeBio文章。

小貼士:將新解凍的細胞與已培養的細胞分開，直到你確定它們是無蟲的，並小心你從哪裏獲得細胞——也許支付ATCC比免費獲得它們更值得。

你還有什麼保持孵化器清潔的方法嗎?把它們貼在下麵。