核酸純化的BOOM方法:終極小妞電影?

的繁榮的方法或稱Boom核酸萃取法，是一種從生物物質溶液中分離核酸的固相萃取技術。這隻是一種華麗的說法，你用這種技術暴露並從細胞中去除核酸。Boom方法首先由William R. Boom開發，利用矽塗層磁珠(SiO₂)結合核酸。這個過程的關鍵是使用朝向劑。這種方法是可靠的，非常適合於在小範圍內快速分離核酸。

這是一個非常簡單和直接的程序——科學家耳朵裏的喜悅之詞!

第一步:準備好食材。

樣品需要經過處理，以使核酸釋放到溶液中。根據你從什麼東西中提取核酸(例如，組織)，你可能首先需要均質你的樣本。接下來，細胞必須被裂解，使用一種特殊類型的裂解緩衝液，稱為朝性劑(見下文)．生物樣品被移液到含有矽珠和朝性劑的反應容器中。你現在有了你的起始材料。

步驟2:矽珠-核酸鍵的形成。

接下來是分離階段。細胞破裂導致核酸暴露。這些會與矽珠結合。樣品被離心以捕獲這些核酸-二氧化矽珠複合物在顆粒中。

第三步:倒垃圾。

為了去除所有的細胞碎片和任何其他汙染物，顆粒要反複清洗:重新懸浮，然後重新離心。然後，讓樣品幹燥。

第四步:分離核酸。

通過降低朝色劑的濃度，將核酸衝洗到洗脫緩衝液中，從珠子中分離出核酸。

不同的溶液可以用來分離特定的核酸，從長雙鏈DNA，到短單鏈RNA，再到環狀核酸。起始材料可以來自許多不同的來源:從細胞培養物，到組織樣本，到身體分泌物和排泄物，到液體，到食物——非常酷!

現在，讓我們更仔細地看看朝性劑不僅作為裂解緩衝劑，而且還允許二氧化矽結合核酸。

朝北特工

混沌性因子的定義是能夠改變蛋白質或核酸的四級、三級和/或二級結構而不破壞一級結構的物質。該劑由溶解在水溶液中的鹽(陰離子)組成。最初的Boom方法使用硫氰酸胍鹽，但也可以使用其他陰離子，如溴，醋酸鹽和硝酸鹽離子。

警告!這種方法的作用機製聽起來像b級青少年電影!

在考慮chaotopic代理時，仔細查看名稱——chaotopic，就像chaos一樣，是有幫助的。我把它想象成一個非常溫文爾雅的紳士充當他最好的朋友的僚機。最好的朋友是矽珠。溫文爾雅的特工聽到他最好的朋友談論他完全迷上的這位女士，美麗的核酸。她甚至沒有注意到他，因為她約會的是一個水分子，兩者是不可分割的。現在，溫文爾雅的特工為他的朋友感到難過，決定用他的魅力說服核酸打破她與水分子的非共價鍵。

溫和的藥劑意識到，要分離水分子和核酸，他必須以形成它們之間連接的磷酸基為目標，這正是他所做的!他說服核酸，水不是她的類型，使她完全疏水。核酸(具體來說，現在暴露的磷酸基)是單獨的，並發現矽珠張開雙臂站立。矽珠看到了機會，帶著同情和巧克力跳了進去，結果在矽珠和核酸之間建立了一個新的紐帶。這一切都進行得很愉快，其他的客人離開了(你把所有的碎片都洗掉了)，所以混亂的代理人開始說再見(我們降低了它的濃度)。一旦嗜朝性因子開始離開，核酸就開始恢複理智，變得越來越親水。她做了什麼!她看到她心愛的水分子在洗脫緩衝液中匆匆流過，打破了她與二氧化矽的結合。它附著在水分子上它們重新形成了非共價鍵。

化學太俗氣了!