擴大可能性:為什麼你需要研究病毒轉導
我們已經研究了不同類型的病毒表達係統以及什麼時候可以使用一種而不是另一種我之前的文章.但是為什麼要使用病毒轉導而不是類似的技術,比如質粒?
隻是提醒一下:轉染是一種實驗室技術,可以將核酸或蛋白質引入細胞。當使用病毒時,這被稱為病毒轉導。各種各樣的病毒被用於這一目的,但最常見的兩種是腺病毒和慢病毒。
病毒轉導在許多實驗中都是有用的,包括基因敲除/基因沉默、蛋白質過表達、幹細胞重編程和分化、細胞係生成、病毒生產以及基因敲除和敲入.方便的是,這種形式的轉染是可行的在活的有機體內或在體外應用程序。
一些優點和缺點(可以找到好的資源在這裏):
病毒轉導的優點:
- 基因傳遞效率為95-100%,因為它們被設計成利用內體逃逸的內在機製將DNA運輸到細胞核中。
- 技術上使用簡單
- 你可以選擇RNA病毒或DNA病毒
- 細胞類型特異性嗎
- 身體區域/部位具體嗎
- 可以是染色體特異性的
- 能感染正在分裂或衰老的細胞嗎
- 表達可以穩定還是短暫
*RNA病毒或逆轉錄病毒製造其基因組的雙鏈DNA副本,以便整合到宿主細胞的DNA中。
病毒轉導的缺點:
- 盡管它們無法複製,但它們仍然需要生物安全級別2設施。
- 複雜的合成過程是勞動密集型的*
- 可能破壞腫瘤抑製基因
- 基因大小的限製
*完整的試劑盒是可用的,但轉導方案需要在包裝細胞係中製備重組載體和隨後的病毒顆粒純化。所有這些都是勞動密集型的
何時使用病毒轉導:
病毒轉染在以下情況下最適用:
- 為了引入你想要大量表達的單個克隆基因,
- 為了引入更短的核酸鏈,
- 如果你的細胞對CaCl不耐2,脂質體修飾和/或電穿孔,
- 表達能力弱
- 你是在傳遞你的DNA在活的有機體內.
在考慮你應該在實驗中使用哪種病毒時,你可以跟著這張海報走!
特色圖片來自拉爾夫•舒爾茨.