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5種破壞DNA的方法

DNA損傷的方式有很多種。雖然傷害的程度或類型可能不會影響你的實驗,但有時足夠的傷害可能會毀了它們。

提前準備是預先警告的,所以這裏有5種方式可以破壞你的DNA。現在你可以盡你所能確保任何損害最小化,給你的實驗工作的最佳機會。

1.暴露在紫外線下。我一直在說這件事很多次越來越無聊了。但事實是紫外線會導致胸腺嘧啶二聚體也毀掉了很多克隆實驗。因此,盡量減少樣品暴露在紫外線下,特別是更具破壞性的短波品種。足夠的說。

2.機械剪切。對DNA的過度粗暴處理(例如移液或渦流)會導致斷裂和劃傷。DNA越長,對剪切就越敏感,所以如果你需要完整的DNA,要特別小心對待像gDNA這樣的東西。

3.酚提取。
苯酚可以氧化堿,尤其是鳥嘌呤。氧鳥嘌呤可以與腺嘌呤錯誤配對,導致錯誤的複製和誘變.幹得好,幾乎沒有必要再提取苯酚了!

4.乾燥.斷裂和刻痕,以及堿基氧化,也可能由DNA的嚴重幹燥引起。這是在特別苛刻的實驗條件下顯示的,在實驗條件下,樣品在二氧化矽中迅速幹燥,但為了防止這種損傷,避免DNA過度幹燥可能是一個好主意。

5.供暖。在水溶液中,DNA受到氧化和酸水解損傷。像大多數化學反應一樣,這些反應會隨著溫度的升高而加速,這就是為什麼我們要在低溫下儲存DNA,你應該避免過度加熱DNA樣本。

現在你知道了。所以對你的DNA樣本放輕鬆點!

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6個評論

  1. 超人 2009年8月1日晚上7點55分

    你能在“幹得好,幾乎沒有必要再進行任何苯酚提取了!”這一點上再展開一點嗎?

    • 尼克 2009年8月3日下午1:12

      嗨,超人

      我的意思是,現在有其他方法來清理DNA,所以如果你不喜歡的話,避免使用苯酚萃取更容易。

      看到的://www.mobtapp.com/2007/10/25/5-ways-to-clean-up-a-dna-sample/獲取詳細信息。

      我不喜歡苯酚萃取,因為我發現它很容易留下溶劑的痕跡,這可能會破壞實驗。但這也是個人品味的問題——我不介意氪石,但我相信你對這種東西有一種厭惡

  2. Fahmin 2009年3月31日早上7:59

    在液氮中粉碎樣品會剪切DNA嗎?比如幹樹葉?

  3. 雷伊 2009年2月8日上午10:06

    避免紫外線照射的一個好的和有用的技巧是使用被可見光-藍光激發的染料。你可以完全避免紫外線和溴化乙錠。如果你正在尋找一種更清潔、更快速的方法來查看和純化你的DNA,電子凝膠就是與這些染料結合在一起的凝膠。

  4. 史蒂夫 2008年9月10日下午4點17分

    從我所做的和讀到的,我認為你可能有點多疑,但我也認為這取決於你用DNA做什麼。不管怎樣,為了安全起見,我隻是盡量限製凍融循環的次數。

  5. MolBioMonk 2008年9月10日下午3:30

    冰凍呢?還是我多疑了

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