蘇木精和伊紅101:第二部分-配方和材料

下麵從H和E 101文章的第一部分，這裏是你自己的H和E工作站需要的材料和食譜(假設你沒有進入組織實驗室)。

下麵列出的許多化學物質都是有毒和/或有害的。處理/儲存時使用個人防護用品，遵守所在機構的SOP，使用COSHH和MSDS表格。

以下是你需要的四種溶液(加上對分級醇的簡單指導);

(1)哈裏斯氏蘇木精溶液。

蘇木素的2.5克

25毫升乙醇

鉀明礬(媒染劑)50克

去離子水500毫升

碘酸鈉0.5 g

醋酸(冰醋酸)20毫升

蘇木精需要被氧化成為一種功能性染料——這是通過加入碘酸鈉來實現的。氧化的蘇木精(“蘇木精”)然後與媒染劑結合，媒染劑使其能夠與核材料結合。

蘇木精溶解在乙醇中，然後加入到鉀明礬中，而鉀明礬之前已經溶解在一個兩升燒瓶中的500毫升溫去離子水中。

將混合物迅速燒開，然後慢慢小心地加入碘酸鈉。將燒瓶放入冷水中或放入裝有碎冰的水槽中冷卻溶液。當溶液冷卻後，加入醋酸，汙漬就可以立即使用了。冰乙酸是可選的，但它的內含物使細胞核染色更加精確和有選擇性。

使用前過濾，每兩周更換一次。

(2)酸酒。

鹽酸，濃縮(sp.gr.1.19) 1 ml

70%乙醇99 ml

(3)史考特自來水。

碳酸氫鈉2克

硫酸鎂20克

去離子水1升

把鹽溶解在水裏。在室溫下儲存原液。

(4)伊紅。

伊紅Y在dH中以1% (w/v)溶液組成₂0(即在100毫升水中加入1克伊紅Y)。

酒精梯度

95%的乙醇

乙醇(GP級)95毫升

去離子水5毫升

80%的乙醇

乙醇(GP級)80毫升

去離子水20毫升

70%的乙醇

乙醇(GP級)70毫升

去離子水30毫升

伊紅Y溶液可以在商業上購買，這是一個比稱重染料粉末更容易的選擇。蘇木精溶液也可以作為現成的溶液購買，但這取決於你是否計劃使用加侖!

H和E染色快樂!