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如何在7個簡單步驟中檢查移液器的準確性

移民差的女人表明需要檢查移液器的準確性

我敢打賭,您可信賴的移液器可能是實驗室中最常使用的工具之一。但是,您是否知道如何檢查移液器的準確性?這是可以在實驗的熱量中刷掉的事情之一。

為什麼要檢查移液器的準確性

移動精度對於成功的實驗至關重要,特別是對於敏感實驗。例如,QPCR依賴於準確的移液器- 估計取決於每個反應中具有相同數量的模板DNA(cDNA或其他)。移液器不準確的僅5%可能會導致模板DNA的2 ng變化。在整個反應過程中,該5%的誤差在幾何上被放大,並導致難以釋放的結果。

在上一篇文章中,我們向您展示了清潔移液器- 現在,讓我們談談如何檢查移液器的準確性。我們將為您介紹如何在僅7個簡單步驟中完成此操作。

您應該多久檢查一次移液器的準確性?

除了每年送您的移液器進行校準外,應定期檢查您的移液器的準確性。您多久進行一次取決於您使用的頻率。

您每天使用的忠​​實移液器?每三個月檢查一次。

備受喜愛但不經常使用的移液器?每年的支票就足夠了。

如何檢查移液器的準確性:水的重量

檢查移液器準確性的最常見方法是稱重水。

水的密度為1 g/ml。這意味著每個微晶格(µL)應使用高精度平衡重量0.001 g。換句話說,如果您的移液器準確,則分配的水量將等於水的重量。因此,如果您的移液器設置為100 µL,則刻度應讀取0.1 g。

什麼會影響移液器的準確性?

在我們深入研究衡量移液器準確性的過程之前,您需要知道一些事情可能會影響準確性(因此,還會影響您測量準確性的方式)。

溫度和壓力如何影響移液器

溫度和氣壓會影響液體的密度,在檢查移液器時應考慮的液體。純水在20時的密度為1 g/ml°C和1個壓力氣氛,因此理想情況下,在這些條件下測量移液的準確性。

請注意我說純水?如果使用自來水,其中含有溶解離子,則密度可能會有所不同。這足以影響您的結果嗎?無需冒險 - 隻是使用蒸餾水。

壓力的效果可以忽略不計,因此,這種壓力的變化不太可能顯著改變您的結果。但是,環境溫度可能具有更大的作用,由於熱膨脹,溫度較高,導致密度較低。

幸運的是,有一些調整方法,因此請確保在測量移液器的準確性時測量環境溫度。

閱讀我們的文章執行移液器校準找出移液器時如何補償溫度差異。

請注意,您還需要確保您正在使用適當校準的餘額。

移液技術如何影響準確性

在檢查移液器的準確性之前,您需要確保使用適當的移液器技術。如果沒有,您將衡量移動技能的不準確性,而不是移液器。

正確的技術涉及在平滑運動中啟動(吸入)和分配(彈出)液體。將移液器尖端放入水中並迅速釋放柱塞會給您帶來不準確的結果,即使您的移液器進行了正確的校準。

實際上,使用適當的移液技術不僅會增加結果的魯棒性(和可重複性),而且還會降低移液器上的磨損。雙贏!

7個步驟檢查您的移液器的準確性

現在您已經閱讀了背景,這是如何以7個簡單的步驟檢查移液器的準確性。無論您使用正排量移液器還是空氣位移移液器,這都可以。

  1. 得到一些DDH2o準備在室溫下的準備,以及您的移液器。
  2. 將稱重船放在微量平衡(或分析平衡)上。確保關門然後零餘額。
  3. 將移液器設置為移液器範圍內的所需音量。
  4. 最好通過在進行第一次測量之前將移液器上下移動來“給移液器提示”幾次,這是一個好主意。
  5. 當一切準備就緒時,抽吸(將水吸入)再次進入尖端,然後將其緩慢彈入重量船。然後,關閉門並記錄重量。
  6. 零餘額,重複步驟3-5左右,大約10次,並平均您的發現。
  7. 對於要檢查的每個卷,請執行此操作。在移液器範圍的範圍結束時,精度通常會丟失,因此,最好測試最小和最大移液器的設計,以及最大數量的50%。

那麼,對於移液器而言,什麼被認為是準確的呢?

實驗室和應用程序之間被認為可接受的錯誤水平可能有所不同(因此請檢查您的實驗室是否設置了公差)。但是,一個良好的通用指南是測量金額在±1%以內。

例如,100 µL的0.099 g可以,但是0.097將不準確。

如果您的移液器不準確,則該對其進行校準了。

如何保持移液器的準確性

保持移離子準確的最佳方法是將它們視為它們所擁有的寶貴工具。確保您:

如何檢查移液器的準確性總結

因此,簡而言之,如果您的移液器不準確,它可能會對您的實驗產生巨大的破壞性影響。為了最大程度地減少不準確性,請每三個月檢查一次移液器的準確性。如果移液器不準確,請對其進行校準。

有關準確性及其與精度有何不同的更多信息,請參見我們的文章如何衡量和提高實驗室的準確性和精度,其中包括一個方便的示例,即檢查移液器的準確性和精度。

我們希望這篇文章能幫助您了解如何輕鬆檢查移液器的準確性以及您使用移液器的任何內容,照顧好它,從長遠來看,它將照顧您的實驗!

本文最初發表於2014年7月21日,審查和更新2022年6月。

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