跳到內容

6實驗室常用洗滌劑

6實驗室常用洗滌劑

在實驗室裏,我們周圍到處都是洗滌劑——這是一件好事!多虧了它們的化學結構在美國,洗滌劑可以溶解並與多種類型的分子相互作用,這使得它們對研究至關重要。為了告訴你為什麼洗滌劑對科學家來說是這麼好的東西,我們將通過分子生物學中的六個例子來說明洗滌劑是必不可少的!

1.阻止非特異性結合

如果你做過免疫分析elisa在美國,你可能已經習慣了清潔劑作為化學阻滯劑。像Tween 20這樣的非離子清潔劑可以可逆地阻斷非特異性結合,而非特異性結合會在免疫檢測中掩蓋目標信號。它們還抑製分子與平板的被動共價結合,並幹擾蛋白質-蛋白質相互作用。然而,像Triton X-100這樣的清潔劑是有效-它們阻斷和抑製你的目標分子!

2.細胞溶菌作用

無論你分離的是DNA、RNA還是蛋白質,第一步都是溶解細胞。由於它們的溶解能力,洗滌劑在破壞細胞和核膜方麵非常出色。當你想分離蛋白質的原生功能形式時,像CHAPS這樣溫和的非離子或兩性離子洗滌劑更適合溶解細胞。相比之下,像SDS這樣的強力離子清潔劑是很好的,當你要做免疫印跡變性的蛋白質。使用清潔劑溶解細胞的一個缺點是它們可以幹擾Bradford和其他蛋白質定量分析!方法通常可以避免此問題BCA蛋白測定,而不是。

3.細胞透化作用

當你需要的時候對那些不方便的FACS細胞內標記進行染色在美國,洗潔精就是為你準備的。但不要使用像SDS這樣刺激性強的洗滌劑!溫和的膜增溶劑,如吐溫20或皂角苷,可以戳出足夠大的孔,讓抗體溜進你的細胞,而不會破壞它們的整個膜。

4.凝膠電泳

無論你是在做原生的,變性的,還是二維凝膠電泳(甚至等電點聚焦)有一種清潔劑可以幫你。如果你不擔心蛋白質的固有結構,那麼像SDS這樣的強力清潔劑會溶解並使它們變性sds - page.但如果你需要保留它們的結構——等電聚焦或原生電泳——那麼像CHAPS這樣溫和的兩性離子清潔劑將是更安全的選擇。

5.溶解和結晶膜蛋白

膜蛋白是一種棘手的東西——就像洗滌劑本身一樣,它們有親水性和疏水性的部分。另外,膜蛋白通常需要嵌入到膜中來保存它們的結構和功能,這使得分離和研究它們變得困難!幸運的是,溫和的清潔劑形成的膠束可以模仿原始磷脂雙分子層的特性。對於分離和結晶膜蛋白,CHAPS可能是一個比Tween或Triton更好的選擇,因為CHAPS具有更均勻的結構。

6.洗你的手

經過這麼多艱苦的工作有危險化學品的實驗室(以及流鼻涕的實驗室同事!),用優質的普通肥皂或抗菌肥皂在自來水下洗手30秒,以保護自己和他人。保證你自己的安全閱讀實驗室安全規範

有了這些有用的功能,洗滌劑在分子生物學中扮演關鍵角色就不足為奇了!看看下麵,了解更多關於洗滌劑的知識,或者閱讀它們是如何使用的用於製藥中製造給藥脂質體

進一步閱讀:

Garavito RM和Ferguson-Miller S。作為膜生物化學工具的洗滌劑.2001.J臨床生物化學.276:32403-6。

吉布斯J。有效阻止程序.康寧公司。2001。

Privé GG.用於膜蛋白穩定和結晶的洗滌劑。2007.方法.41:388 - 397。

分享到你的網絡:

留下你的評論

你必須登錄發表評論。

這個網站使用Akismet來減少垃圾郵件。了解如何處理您的評論數據

滾動到頂部
Baidu
map