Shoba Anantha
文章通過Shoba Anantha
當我第一次聽說觸地聚合酶鏈反應時，我想到的是著陸飛機，事實證明，這是一個不錯的思考方式。但是，盡管觸摸式PCR (TD-PCR)易於類比和可怕的雙關語(見標題)，作為一種非常有用的提高PCR擴增特異性的技術，它可能更棘手，因為它可能……
幾年前，作為一個研究實驗室的大一新生，我接到的第一個項目是用移液管將微小體積的水滴到一張副膜上。無聊!稱量副膜上的液體，並比較每個微體積的10個重複的重量，持續一周，然後我才接觸到裏麵的任何東西……
聚合酶鏈反應是高度敏感的，但這一特性的缺點是它使這項技術容易產生假陽性。在PCR是主流技術的實驗室裏，就像我工作的那個實驗室，任何假陽性結果通常都是由於擴增子汙染。斷掉的毛細血管或PCR板不小心留在…
水解探針，通常也被稱為TaqmanTM，是一種非常流行的實時PCR化學方法。在本文中，我將比較水解探針與PlexorTM。但首先，快速概述一下水解探針。水解探針是RTPCR中用於檢測序列特異性擴增的常用檢測化學方法。就像SYBR一樣…
在我的上一篇文章中，我向您介紹了神經叢係統。我們已經知道，在使用SYBR Green進行檢測的反應中，熒光隨著PCR產物的積累而增加，而在Plexor中，熒光則減少。今天我想比較SYBR Green化學的其他一些眾所周知的特性，看看如何……
在實時PCR中，有兩種主要的方法檢測擴增子使用熒光監測。一種是基於插入劑的染料，如SYBR Green，另一種是基於探針的技術(水解或雜交探針)。所有這些方法都有一個相似的測量放大過程中增加的熒光的機製。但還有另一種完全不同的量化方法。
在設置實驗時，控製顯然是非常重要的。沒有它們，就不可能對實驗結果進行有意義的解釋。我說很明顯，但在我之前的工作中，我是一名技術服務科學家，你會驚訝地發現我經常與客戶談論控製的重要性。一位顧客評論說，在我們……
在我的上一篇文章中，我介紹了無細胞蛋白質合成。今天我想談談體外無細胞蛋白表達的一個主要瓶頸;較低的收益率。通常情況下，關注模板純度和設計、轉錄和翻譯抑製劑、鉀和鎂濃度等重要因素將解決任何低…
無細胞蛋白質合成(又名體外轉譯)指的是在體外利用裂解物生產蛋白質，裂解物提供合成所需的細胞機製。裂解物可以是細菌或真核生物來源。它是一種有用的替代體內合成的蛋白質，用於研究蛋白質:蛋白質相互作用(下拉試驗，…
qRT-PCR(定量逆轉錄聚合酶鏈式反應)是目前mRNA檢測和定量的金標準技術，其靈敏度足以對單個細胞的RNA進行定量。逆轉錄(RT)步驟是qRT-PCR實驗中可變性的主要來源，因此最佳的逆轉錄是可靠和成功的…
真核細胞的轉染是一種常規但有時很棘手的過程。市場上有幾種可用的轉染試劑，但有時舊的方法是最好的。我發現對於真核細胞來說，最簡單、最快和最便宜的轉染方法是磷酸鈣介導轉染(1)。它的主要優點是，由於Ca2+是…