DNA / RNA操作與分析
展示你的分子TALEN(T)
你知道嗎，僅僅在短短10年前，利用基因工程來改善某些人類疾病的想法還被認為是“科幻小說”?雖然在基因工程之前，細胞誘變研究和基因敲除實驗是可行的，但它們都不是很可靠。事實上，由於這些古老的…
閱讀更多NGS目標濃縮戰略
下一代測序技術(NGS)開創了一個了解基因組內部運作和功能的新時代。NGS使研究人員能夠觀察與個體基因差異或突變有關的特征，包括疾病。由於隻有大約1%的人類基因組構成了編碼蛋白質的基因，幾個…
閱讀更多EMSA -教老狗新把戲
電泳遷移率轉移試驗(EMSA)是一種檢測核酸-蛋白質複合物特異性結合的強大技術。在過去的30年裏，EMSA一直是研究核酸(DNA或RNA)和核酸結合蛋白之間質的相互作用的“方法”。通過使用無線電標簽…
閱讀更多從血液中分離細菌RNA
幾十年來，檢測敗血症的唯一方法——血液中的細菌生長——是將細菌分離出來，並在一種特殊的培養基上培養菌落。這是通過首先旋轉血液，使血細胞和細菌進入小球。藥丸被鋪在一個血瓊脂板上。
閱讀更多如何(為什麼)標記核酸
你是否曾希望用套索抓住DNA或RNA的單鏈?還是逐個觀察它們，弄清楚它們究竟在哪裏，在做什麼?幸運的是，現在有技術可以標記核酸，使其可視化和純化!核酸可以在…
閱讀更多閱讀質粒地圖的初學者指南
通常質粒圖，尤其是由一個早已被人遺忘的博士生手繪的曆史質粒圖，是一個謎。這些箭頭和盒子是什麼?我該從哪裏開始呢?別擔心，我們有速成班介紹如何破譯質粒圖譜。讓我們從一個經典的質粒開始:pBR3221。它……
閱讀更多RNAseq文庫製備:從細胞到cDNA
RNAseq文庫，也被稱為全轉錄組鳥槍測序文庫，提供了細胞過程的快照。這使得研究人員能夠獲得有關轉錄組在環境變化、疾病期間或藥物應用後的變化的信息。RNAseq文庫還允許檢測mRNA剪接變異和snp。RNAseq庫實際上有…
閱讀更多為您的應用選擇正確的DNA分離試劑盒
如果你計劃在實驗室中使用純化的DNA，你很可能會使用商業DNA提取試劑盒來分離和純化你感興趣的DNA。有這麼多類型的套件可供選擇，當與一個不熟悉的工作時，選擇一個最好的可能是一個主要的挑戰…
閱讀更多你在原地嗎?-整合您的第一個RNAscope®檢測
您正在考慮嚐試RNAscope®。畢竟，RNAscope®有望提高原位雜交的敏感性和特異性。然而，隨著RNAscope產品線中可用的眾多套件和試劑，開始可能有點令人不知所措。下麵是選項的概述，可以幫助您導航到……
閱讀更多RNA擱淺:一條雙向的道路
對於大多數分子生物學目的來說，DNA被認為是一串3 '到5 '的核苷酸，相應的mRNA序列與這串DNA互補。然而，將這種奇怪的DNA結構可視化——兩條反平行的鏈連在一起——對許多應用都非常重要，比如……
閱讀更多下一件大事:選擇性聚腺苷酸化
什麼是選擇性聚腺苷酸化?mRNA的加工及其調控是基因表達的基礎。隨著科學的進步，選擇性聚腺苷酸化在基因表達的潛流中占據了中心舞台。1,2多聚腺苷酸化是mrna前成熟過程的一部分，涉及到新生RNA的3 '端多聚腺苷酸化。這個過程發生在……
閱讀更多非編碼rna的重要性
什麼是非編碼rna ?曾經被認為是“垃圾”的東西可能最終會成為我們基因組中最重要的部分。非編碼RNA (ncRNA)是從DNA轉錄而來的RNA，但由於它不為蛋白質編碼，因此偏離了“中心原則”。ncrna在真核生物中無處不在:而90%的真核生物基因組是……
閱讀更多無限製酶或連接酶克隆協議
有許多克隆方法不需要限製性內切酶或連接酶。閱讀下麵了解如何通過拓撲異構酶克隆、SLIC和Gibson實現無縫克隆結果。方法一:拓撲異構酶技術拓撲異構酶技術不需要特殊的引物和連接酶——它和克隆一樣簡單。這項技術是基於…
閱讀更多克隆方法:5種不同的組裝方式
在過去的幾十年裏，分子生物學家已經開發出簡化和標準化克隆過程的程序，使大量的人工DNA結構陣列更容易地組裝起來。你熟悉所有的克隆選項嗎?讓我們看看可以用來獲得構造的五種不同克隆方法。最後……
閱讀更多連接獨立克隆引物設計
獨立結紮克隆(LIC)是一種不需要結紮就能保證克隆成功的簡單有效的方法。雖然技術很簡單，但設計引物可能有點棘手。在這篇文章中，我們將簡要介紹連接無關克隆引物的設計。
閱讀更多核酸101:確認其質量
核酸101:確認其質量加入我們的網絡研討會，Victoria Doronina博士將幫助您確定您的核酸質量。在本教程中，您將發現:如何選擇最佳的方法來提取您的核酸，您應該選擇哪種方法來測定核酸…
閱讀更多慢病毒轉導的初學者指南
在過去的20年裏，利用病毒傳遞係統轉導細胞進行基因和蛋白質研究已經變得非常突出。特別是，使用慢病毒載體可以穩定表達你感興趣的基因。隻要有一點點核酸的魔力，這一切都是可能的。慢病毒(一種逆轉錄病毒)表達逆轉錄…
閱讀更多如何使用CRISPR加速癌症治療
如何使用CRISPR加速癌症治療加入Theo Roth，他描述了他的實驗室的新型CRISPR- cas9基因組靶向係統，不需要病毒載體修改T細胞基因組，而是專注於HDR。這使得在原始人類基因組的特定位置插入大量的DNA序列成為可能。
閱讀更多利用CRISPR/Cas9高速AFM檢測DNA單分子序列
Jason Reed博士介紹了一種新的方法，通過這種方法，內切酶抑製的Cas9可以作為高速原子力顯微鏡(HS-AFM)成像中的可編程生物標誌物。在本教程中，您將發現:如何使用CRISPR/Cas9“標記”更改和突變……
閱讀更多老可靠:兩步等位基因交換
操縱生物體的基因對於研究它們的功能至關重要。在基因工程出現之前，科學家會用x射線照射細菌，或將它們暴露在破壞性的化學物質中，直到產生自發突變。幸運的是，目前的方法更複雜，更少折磨。研究人員現在使用更直接的技術來引入突變。有幾種方法……
閱讀更多定量RT-PCR靶基因驗證從頭到尾指南
在本教程中，您將發現:雖然下一代測序使研究人員能夠揭示整個基因組的表達水平，但qRT-PCR仍然是測量單個基因轉錄水平的金標準，用於功能研究和……
閱讀更多利用qPCR驗證複雜樣本中病原DNA和糞便中人類DNA的表觀遺傳富集
qPCR是分子生物學中最特異、最靈敏的工具之一，可以定量檢測小於1 / 106的目標DNA分子。下一代測序技術(NGS)也有類似的潛力。然而，在大多數臨床或環境樣本中存在大量的非靶DNA，這妨礙了對…進行簡單和廉價的分析。
閱讀更多從果蠅中分離RNA -別讓角質層嚇到你!
從果蠅幼蟲或成年頭部中分離RNA似乎有點令人生畏，主要是由於角質層的存在。角質層是一種保護性外骨骼，由不溶性膠原蛋白、角質層素、糖蛋白和脂質組成。雖然去除角質層可能需要一些力量，但你可以很容易地做到這一點，而且不會損害你的……
閱讀更多利用DNA組裝進行藥物發現的指南
目前的DNA合成和組裝技術給了今天的基因工程師前所未有的自由，可以控製基因設計的各個方麵。在這個DNA組裝的網絡研討會上，您將學習:DNA組裝的關鍵概念的重要性，分析遺傳設計的組合文庫的天然產品生物合成的新興領域的研究加入邁克爾·斯曼基博士作為…
閱讀更多重要的小差異:檢測微衛星多態性
如果你接受過遺傳學方麵的培訓，很有可能在你接受教育的過程中，你遇到了那些被稱為微衛星的有趣的小序列。這些是1-6個核苷酸長的重複串聯基序，分散在我們的基因組中。這些DNA過去被稱為“垃圾DNA”，因為研究人員認為這種重複沒有任何作用。如今,…
閱讀更多DNA足跡
研究dna -蛋白質相互作用是分子生物學的一個重要方麵。研究人員使用多種方法來研究這些問題，如染色質免疫沉澱(ChIP)試驗、電泳遷移率轉移試驗(EMSA)、DNA拉下試驗、熒光素酶報告試驗、過濾器結合試驗、酵母單一雜交係統等。另一個有助於研究dna -蛋白質相互作用的有趣實驗是…
閱讀更多微rna提取循環
想研究細胞外RNA，特別是microRNA嗎?繼續閱讀一些提取循環microRNA的好方法。
閱讀更多細菌轉化初學者疑難解答
我第一次做轉化是在位點定向突變的時候。我克隆了一個蛋白質序列到p15TVL載體，創造了我的突變體(但那是另一個故事)，並最終準備下一步:轉化和表達我想要的蛋白質。我沒想到我的熱情會下降。
閱讀更多限製性酶:切肉前要考慮的五件事!
自20世紀70年代以來，使用限製性內切酶來表征DNA一直很流行。今天，這種“老派”技術仍然是評估DNA序列最簡單、最快的方法之一。像大多數實驗室試劑一樣，限製性內切酶可能是變化無常的，在使用它們時你應該記住幾件事。一般來說，粘端酶具有更大的…
閱讀更多你工具箱裏的位點特異性重組酶
我們大多數人都知道基因工程係統，如creo - lox, TALENs，鋅指係統，當然還有CRISPR-Cas9。這些都是csssr -保守位點特異性重組的例子。我們經常使用這些位點特異性重組酶，但我們真的了解它們嗎?這些工具的未來會怎樣?原來csc…
閱讀更多利用合成DNA進行長期數據存儲
需要長期存儲的數據量正在增長和加速。目前的長期數字存儲技術無法跟上。想象一下，隨著越來越多的計算機和網絡基礎設施上線，在這個世界上每天大約產生2.5億億字節的數據。對於普通用戶，長期存儲解決方案可能不是問題。然而,組織和…
閱讀更多從存檔組織中尋找mirna ?是的，這是可能的!
我們通常使用熒光原位雜交(FISH)技術來檢測組織中的DNA或RNA序列，但微RNA (miRNAs)呢?不用擔心，FISH現在已經優化以應對挑戰。為了幫助你使用這種方法，以下是你需要知道的。我想到的第一件事是……
閱讀更多轉染工具包
通過工程突變或過表達重組蛋白來研究和表征其在哺乳動物細胞中的功能並非易事。幸運的是，自20世紀50年代以來，中國倉鼠卵巢(CHO)細胞一直是實驗室的支柱，代表了一個相對容易的哺乳動物模型係統。有幾種方法可供選擇。
閱讀更多把你的聚合酶循環裝配寡聚在一起
聚合酶鏈式反應(PCR)是許多實驗室技術的支柱。簡而言之，它允許DNA特定片段的指數擴增。通過使用編碼限製性內切酶位點的引物，這些擴增片段被用於下遊克隆程序，通常導致插入一個或兩個PCR片段……
閱讀更多如何用Chelex樹脂從幹燥的血斑中提取DNA
每一個想要分析DNA的生物科學家都知道，這一過程始於從感興趣的細胞中提取DNA。這些細胞可能是紅細胞、寄生蟲或細菌等。此外，根據樣品類型、下遊分析等等，還有各種各樣的DNA提取方法可供選擇。許多科學家……
閱讀更多苄基異戊醇:一種新奇、奇異和有效的DNA純化工具
我們都使用我們最喜歡的技術來克隆DNA，如Gibson組裝，TOPO克隆，非連接克隆(LIC)和TA克隆。然而，自90年代以來，DNA純化方法本身並沒有發生太大變化。曆史上，1956年引入苯酚萃取法，從大鼠肝髒中提取核酸，迅速取代了以前的…
閱讀更多在農杆菌的低質粒產量周圍的提示和技巧
不久前，我們的一位讀者詢問了一種從轉化農杆菌細胞中提取質粒的快速、簡便和快速的方法。他們指出，農杆菌的質粒拷貝數通常很低，堿基微型製備方案的產量可能很低。簡而言之，沒有……
閱讀更多CRISPR/Cas9交付指南:如何最大化您的編輯效率
在本次網絡研討會上，您將學習如何使用CRISPR/Cas9最大化您的基因組編輯效率，以及如何在您的研究中應用該技術。網絡研討會的要點將包括:如何使用特定於基因組的在線工具設計導向rna以及感興趣的應用。幫助你的技巧和實用建議…
閱讀更多定量和評估RNA: TE還是not TE?
紅色藥丸還是藍色藥丸?進行科學研究經常涉及許多困難的決定!我一直在RNA協議中看到它——“優雅的”選擇使用純淨水或Tris-EDTA (TE)緩衝液來溶解(或洗脫，如果你使用柱狀純化)RNA。當我接受用紫外分光光度法評估RNA的培訓時，我畢業了……
閱讀更多讓CRISPR試劑進入細胞的四種方法
閱讀各種遞送CRISPR試劑的方法，以及如何在它們之間進行選擇。
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